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为什么细菌染色液是碱性的?具体操作步骤又有哪些?
发布时间:2019-02-18   点击次数:54次
  细菌染色液是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。此法操作简便,适用于菌体一般形状和细菌排列的观察。
 
  细菌染色液为碱性染料这是因为:在中性、碱性或弱酸性溶液中,细菌细胞通常带负电荷,而碱性细菌染色液在电离时,其分子的染色部分带正电荷,因此碱性细菌染色液的染色部分很容易与细菌结合使细菌着。染色后的细菌细胞与背景形成鲜明的对比,在显微镜下更易于识别。
 
  细菌染色液的具体操作步骤:
 
  1、涂片
  a、取一块干净的载玻片,平放,在载玻片中央滴一小滴生理盐水。
  b、用接种环无菌操作从琼脂斜面上挑取适量菌苔。
  c、将挑取的菌苔沾入载玻片中央生理盐水中混匀并涂成薄膜。
 
  2、干燥
  将涂好菌膜的载玻片平放在室温下自然干燥。也可用电吹风低温吹干。
 
  3、固定
  手持(木夹夹住)已干燥的涂有菌膜的载玻片,涂面朝上,在酒精灯火焰上通过2~3次。
  原理:加热使细菌细胞的蛋白质凝固,从而固定细菌细胞形态,并使之牢固附着在载玻片上。


细菌染色液

  4、染色
  将热固定的细菌涂片平放于在载玻片架上,滴加染液于涂片上。
  染色时间:吕氏碱性美蓝染色1~2min;石炭酸复红染色约1min;草酸铵结晶紫染色约1min。
 
  5、水洗
  将细菌涂片上染液倒入废液缸中;手持细菌染色涂片,置于废液缸上方,用洗瓶中自来水冲洗涂片,直至流下的水无色为止。
 
  6、干燥
  自然干燥:平放于室温,自然干燥。
  吹干:用电吹风冷风或低温热风吹干。
  吸干:平放在一张吸水纸上,上面覆盖一张吸水纸,将细菌涂片两面水分吸干。

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